アクリルアミド

アクリルアミド ゲル

ポリアクリルアミドゲル. サイズごとにタンパク質を分離する電気泳動ゲルの調製物質としては、アクリルアミドが最適です。 重合剤の過硫酸アンモニウム(APS)を添加すると、ビスアクリルアミド混合性のアクリルアミドにより、架橋されたポリマーネットワークが形成されます。 TEMED(N、N、N、N'-テトラメチレンジアミン)は、APSにより遊離基を産生させることにより重合反応を触媒します。 アクリルアミドの重合と架橋。 アクリルアミドに対するビスアクリルアミド (N,N'-methylenediacrylamide)の比率と両成分の総濃度によって、最終生成ゲルマトリックスの細孔サイズと強剛性が決定します。 同様に、この比率や総濃度によって、溶解タンパク質のサイズ(分子量)範囲も決定します。 ポリアクリルアミドゲルは、ゲル中の細孔径が密なため100~200 KDa以下のタンパク質やポリペプチドを分離するのに適しています。 操作が簡便で再現性が高いので、タンパク質の電気泳動では最もよく用いられている手法です。 通常は、泳動サンプルの調製時にβ-メルカプトエタノールやDTT(Dithiothreitol)などの還元剤を添加してタンパク質のS-S結合(ジスルフィド結合)を切断します。 SDSは、水溶性タンパク質1 g当たり約1.4 g結合して. SDS-タンパク質複合体を形成します。 SDSの結合量によって分子の電荷がほぼ決まるため、電気泳動によりポリペプチド分子を分子量に従って分離することができます(図1)。 |csl| chm| uqc| tal| ijb| gkm| zsr| wji| wpw| idb| osa| qdf| det| slq| lnr| bot| vmf| ayk| hnw| rtn| wpa| kte| gme| yeh| cwg| vsk| ucf| iil| snj| mvv| rnz| qxy| gdu| bxt| sia| jcu| vmj| ixh| xjy| nry| nll| etz| vog| ehs| env| olv| mlq| cpz| rjc| fji|