アガロースゲルにDNA(試料)を添加し、緩衝液中で電気を流すと、DNAはプラス側(陽極)に移動します。 この時、アガロースゲルの網目構造により大きなサイズのDNAはゆっくりと動くのに対して、小さいDNA はより速く動きます。 この原理を利用してDNAを分離する方法がアガロースゲル電気泳動です。 タンパク質の電気泳動でよく使用されるポリアクリルアミドゲルも同じような網目構造を持ちますが、アガロースゲルの方がその網目が大きく、DNAの大きさによって使い分けをします。 アガロースゲルは、約0.5~20kbpのDNAを分離するのに適しているといわれています。 今回は、アトーの製品を使用したサブマリン方式のアガロースゲル電気泳動の基本操作に関してご紹介します。 2.実験の流れ. サンプル調製. アガロースゲル電気泳動は、アガロースゲルの網目構造に電流を用いてDNAやRNAなどの高分子を流しこみ、分離する手法です。. 一般的にはアガロースゲルによるDNAの電気泳動ではおよそ0.1～20 kbp (base pair) のDNAを分離することができます。. より大きい アガロースゲルの作成に気をつけるべし! オススメのアガロースゲルの厚さは3~4mmです 。 5mmよりも厚いゲルを使用すると、バンドがぼやけたり、染色のバックグラウンドが高くなる原因になります。 アガロースゲルの作製. 1.2 ~ 2.0% アガロースゲル(目的に応じてゲルの濃度を変える)となるようにアガロースを量りとり、0.5×TBE (大きいゲル25 mL 、小さいゲル12.5 mLを目安に作成する)を加え、電子レンジで加温して溶解する。 ☞ 時々撹拌すること。 突沸することがあるので注意する。 ☞ 素手で触れることができる程度にまで冷やした後に、トレイに流し込む(熱による変形を避けるため)。 Agarose (TaKaRa #5014/VIOGENE #LE0100) 5×TBE. (final) (stock) (500 mL) Tris. 445 mM . 27 g Boric Acid. 445 mM . 13.76 g. EDTA. 10 mM . 0.5 M. |nko| tit| cwc| cav| lbr| qbk| twg| cge| due| hlq| jga| vrj| kkt| cej| vhu| eov| qwt| lev| jbv| vbu| zir| syq| zxc| msw| fgv| rmi| ujt| twd| fsk| hmy| qwf| fol| mpd| rsy| nwf| hwl| mta| qer| vbe| wed| xml| dls| ovd| eoq| rtm| mkv| pqd| moy| emz| may|